噬菌体抗体库技术

噬菌体抗体库技术是一种创新的抗体库技术，它利用噬菌体作为载体，在细菌上表达抗体片段，这些片段可以被检测并在噬菌体颗粒表面展示。这种方法使得筛选过程更加简单，因为不需要对细菌克隆的可溶性表达产物进行检测。经过多次抗原吸附、洗脱和扩增步骤，能够筛选出所需抗体克隆。筛选得到的噬菌体抗体克隆可以通过插入琥珀突变子以及使用不能阅读琥珀突变的受体菌来获得可溶性的Fab或scFV。

技术原理

噬菌体抗体库技术由Burton等人开发，他们成功地将人类抗体编码基因克隆至噬菌体中，并通过工程菌表达了具有高活性的抗体片段Fab。这些Fab片段的抗原中和能力甚至超过了天然人类抗体。这项技术采用了双相表达载体，使基因克隆过程中的载体既可以呈现噬菌体形式，也可以呈现噬粒形式。噬菌体系统的运作模式类似于人体的B细胞系统，不同噬菌体对应着不同的抗原，其中包含编码抗体的基因，而表达的蛋白质则位于外部。

应用前景

噬菌体抗体库技术的发展使得单抗的人源化、小型化和多功能化成为可能。如果能建立一个容量足够的全套抗体库，理论上可以从其中筛选出对抗任何抗原的单克隆抗体。噬菌体抗体库的有效表位多样性对其实际应用至关重要。噬菌体抗体是指在噬菌体表面表达有抗体分子Fab或单链抗体的单链噬菌体，也被称为纤丝状噬菌体，如常见的M13。这种表面表达是通过Fab或单链抗体与单链噬菌体外壳蛋白(P或P)形成的融合蛋白来实现的。

参考资料

抗体噬菌体展示服务.泰克生物.2024-10-29

噬菌体展示技术.天津卡梅德.2024-10-29

先导抗体分子发现服务.华美生物.2024-10-29