高效液相色谱柱
高效液相色谱柱是高效液相色谱系统的重要组成部分，由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等构成。其工作原理是将样品溶液注入流动相，通过色谱柱内的分离过程，最终实现样品的分离和检测。
结构原理
空柱结构
高效液相色谱柱的空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。柱接头采用低死体积结构，两端分别为7/16英寸和3/16英寸的内螺纹，分别与相应规格的柱管和连接管配合使用。柱管两端放置不锈钢滤片，用于封堵柱填料。所有组件均采用316L不锈钢材质，能够承受常见的溶剂作用，但对于含有氯化物的溶剂需要注意防腐蚀。
柱填料
液相色谱柱的分离作用主要发生在填料与流动相之间的相互作用。柱子的分类取决于所使用的填料类型。正相柱通常使用硅胶作为柱填料，分为无定型和球型两类，颗粒直径范围为3至10微米。反相柱则以硅胶为基础，表面键合有十八烷基官能团（ODS），同样分为无定型和球型。
使用要求
填充剂要求
高效液相色谱柱的填充剂种类多样，包括化学键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶、其他类型的硅烷键合硅胶、硅胶、离子交换填充剂、凝胶或多孔微球等。填充剂的性能和色谱柱的填充方式直接关系到样品的保留行为和分离效果。分析柱的填充剂粒径一般在3至10微米之间，特殊情况下可选择更小或更大的粒径。
温度要求
以硅胶为载体的普通键合固定相的使用温度不应超过35℃，特殊情况可适当提高，但不得超过60℃。
流动相要求
流动相的pH值应在2至8之间。高于8时可能使硅胶溶解，低于2时可能导致键合相水解脱落。使用极端pH值的流动相时，应选择相应的耐酸或耐碱填充剂。